细菌/真菌MLST分型服务
来源:忠科集团
忠科集团提供的细菌/真菌MLST分型服务,MLST(Multi-LocusSequenceTyping,报告具有CMA,CNAS认证资质。

MLST(Multi-Locus Sequence Typing,多位点序列分型)是一种基于细菌或真菌特定的管家基因(housekeeping genes)序列差异进行菌株分型的方法。这种技术通过PCR扩增和测序一组(通常为7个)在不同物种中保守、但在同一物种内具有多态性的基因片段,然后根据这些基因片段的序列差异对细菌或真菌进行分类和分型。
细菌/真菌MLST分型服务就是指利用MLST技术,为客户提供的针对特定细菌或真菌菌株进行精确分型的服务,以便进行流行病学监测、溯源分析、种群遗传结构研究以及抗菌药物耐药性研究等。
细菌/真菌MLST分型服务标准
MLST(Multi-Locus Sequence Typing,多态性序列分型)是一种基于多位点基因序列分析的细菌或真菌分类和分型方法。对于细菌/真菌MLST分型服务标准,通常包括以下几个方面:
1. **实验设计**:选择具有高度变异性和种内遗传稳定性的一组管家基因(housekeeping genes),这些基因在物种间差异大,在物种内相对稳定。每个物种的MLST系统都有特定的这组基因。
2. **测序技术**:采用高精度的测序技术,如Sanger测序或二代测序技术进行PCR产物的测序。
3. **数据处理与分析**:对测序结果进行比对分析,确定每个管家基因的等位基因型,并根据特定数据库计算出样品的序列类型(Sequence Type, ST)。
4. **质量控制**:保证实验过程中的试剂、设备以及操作步骤的质量,确保数据准确性。同时,提供详细的实验记录和原始数据,以便复核。
5. **报告出具**:报告应明确列出所检测样本的ST信息,必要时可进一步通过eBURST算法分析群体结构,构建系统发育树等,以揭示菌株间的遗传关系及进化历程。
6. **服务周期与费用**:明确服务周期,合理定价,并确保服务过程中的沟通及时有效。
以上为一般性的MLST分型服务标准,具体的标准可能因不同实验室和服务机构而有所差异,但都需要遵循科学严谨、准确可靠的原则。
细菌/真菌MLST分型服务流程
细菌/真菌MLST分型服务流程一般包括以下几个步骤:
1. 样品收集与预处理:
客户提供待检测的细菌或真菌样本,通常为临床、环境或其他来源的菌株。
样本在实验室进行纯培养,以确保后续实验针对单一菌株。
2. DNA提取:
从纯培养的菌株中提取基因组DNA,这通常是通过化学或酶法裂解细胞,然后通过柱式或磁珠法等方法纯化DNA。
3. PCR扩增:
针对MLST(多态性序列 typing)设计的7个管家基因(housekeeping genes)进行PCR扩增。这些基因的选择基于它们在种内具有足够的遗传多样性,而在种间则相对保守。
4. 测序:
对PCR产物进行Sanger测序或者高通量测序,得到每个管家基因片段的核酸序列。
5. 序列分析:
将获得的序列与已知MLST数据库中的序列进行比对,确定每个管家基因的等位基因类型(Allele)。
根据7个管家基因的等位基因组合,进一步确定菌株的序列型(Sequence Type, ST)。
6. 报告出具:
分析结果整理成报告,包含菌株的MLST分型信息、所对应的谱系或克隆群信息(如有),以及可能的耐药性、毒力等关联信息(如数据库可提供)。
7. 结果解读及咨询服务:
服务提供商根据结果为客户进行专业解读,并就后续研究或防控策略提供咨询建议。
需要注意的是,不同实验室或服务提供商的具体流程可能会有所差异,但核心的MLST分析步骤大致相同。