16S/ITS分型测序服务
来源:忠科集团
忠科集团提供的16S/ITS分型测序服务,16SrRNA基因测序和ITS(InternalTranscribedSpacer)测序是两种微生物分类与鉴定的分子生物学方法,广泛应用于微生物组学研究,报告具有CMA,CNAS认证资质。

16S rRNA基因测序和ITS(Internal Transcribed Spacer)测序是两种微生物分类与鉴定的分子生物学方法,广泛应用于微生物组学研究。
1. 16S rRNA基因测序:这是针对细菌和古菌进行分类鉴定的一种常用手段。16S rRNA基因在所有细菌和古菌中普遍存在,并且具有高度保守性和种间变异性的特点,通过对其部分或全部序列进行测序,可以对环境样本、临床样本等中的微生物群落进行物种组成分析和系统发育关系推断。
2. ITS测序:主要应用于真菌分类与鉴定。ITS是指真菌核糖体DNA转录单位(rDNA)中18S、5.8S和28S rRNA基因之间的两个非编码区(ITS1和ITS2),这两个区域在不同真菌种类之间具有较高的种间变异,因此通过对ITS序列的测序和分析,可以实现对复杂样本中真菌类群的精确鉴定和多样性的评估。
所以,“16S/ITS分型测序服务”就是指提供对样品中的细菌、古菌及真菌进行高通量测序、生物信息学分析以及物种鉴定的服务。
16S/ITS分型测序服务标准
16S rRNA基因测序和ITS(Internal Transcribed Spacer)测序是两种常用的微生物分类与鉴定技术,主要用于研究环境样本、临床样本或其他样本中的微生物群落结构。对于16S/ITS分型测序服务,其标准通常包括以下几个方面:
1. **实验设计**:根据研究目的和样本特性选择合适的测序区域(如16S rRNA的V3-V4或V4-V5区,ITS的ITS1或ITS2区等),并确定足够的样本量以保证结果可靠性。
2. **样品处理**:样本DNA提取应确保质量与浓度满足建库要求,且尽量减少污染。对于PCR扩增过程,应使用具有广泛覆盖性的引物,并在实验过程中进行严格的质量控制。
3. **文库构建与测序**:高质量地完成PCR产物纯化、定量、文库构建等工作,采用高通量测序平台(如Illumina MiSeq、HiSeq等)进行测序,保证足够的测序深度和覆盖度。
4. **数据处理与分析**:
- 数据质控:对原始测序数据进行质量过滤、去除接头序列和低质量reads。
- OTU聚类与物种注释:通过比对数据库(如Silva、Greengenes、UNITE等)进行OTU聚类和物种注释,给出各菌群或真菌群的相对丰度。
- 生物信息学分析:提供Alpha多样性指数、Beta多样性分析、主坐标分析(PCoA)、冗余分析(RDA)等统计分析结果,以及功能预测分析(如PICRUSt、Tax4Fun等)。
5. **报告出具**:提供详细的实验流程记录、数据分析结果及可视化图表,同时对实验结果进行科学合理的解读。
6. **服务质量保证**:服务方应具备完善的实验室质量管理体系,遵循ISO/IEC 17025等相关标准,确保实验过程规范、结果准确可靠。
请注意,具体的服务标准可能会因不同的测序服务商而略有差异,因此在选择服务商时,需要详细了解其提供的服务内容与质量保证措施。
16S/ITS分型测序服务流程
16S/ITS分型测序服务流程通常包括以下几个步骤:
1. 样品收集与预处理:
客户根据研究需求,收集环境样本(如土壤、水体、肠道内容物等)、微生物培养物或其他含有微生物DNA的样品。
样品运送到测序服务公司,进行DNA提取。这一步骤中,通过化学或物理方法将微生物的DNA从样品中释放并纯化出来。
2. PCR扩增与文库构建:
针对16S rRNA基因(用于细菌和古菌分类)或ITS区域(用于真菌分类),设计特异性的引物进行PCR扩增。
扩增产物经过纯化后,接上测序接头,构建高通量测序文库。
3. 测序:
利用Illumina MiSeq、NovaSeq或其他高通量测序平台,进行二代测序(NGS)。
4. 数据处理与生物信息学分析:
测序原始数据经过质量控制,去除低质量序列,然后进行OTU聚类(Operational Taxonomic Units,操作分类单元)。
对每个OTU进行物种注释,基于NCBI、RDP等数据库比对以确定其分类地位(属、科、目、纲、门、界等)。
进行α多样性分析(反映样品内部物种丰富度和均匀度)、β多样性分析(比较不同样品间的物种组成差异)、以及相关性分析等。
5. 结果解读与报告撰写:
根据分析结果,评估样品中的微生物群落结构,解析群落构成及丰度变化,并提供可视化图表和详细报告。
根据客户要求,可能还会进行功能预测、网络构建、差异物种筛选等相关深入分析。
以上就是16S/ITS分型测序服务的一般流程,具体流程可能会根据不同的服务提供商有所调整和优化。