Transwell共培养

Transwell共培养是一种在体外研究细胞间相互作用的实验方法，主要利用Transwell小室（一种特殊设计的双室装置）实现。该装置由一个上室和一个下室构成，上下两室之间由一张微孔膜（如聚碳酸酯膜）隔开，膜上有一定直径大小的孔洞。
在进行共培养时，研究人员可以将不同类型的细胞分别接种在Transwell小室的上室和下室中。由于膜上的孔洞有一定通透性，使得细胞间的分泌因子、代谢产物、信号分子等可以通过孔洞在两个腔室之间进行交换，模拟体内细胞间的间接相互作用，但细胞本身不能直接接触。
这种方法广泛应用于肿瘤侵袭转移、免疫细胞与靶细胞相互作用、血管生成、细胞趋化性等多种生物学过程的研究中。

Transwell共培养标准

Transwell共培养是一种体外细胞培养技术，主要用于模拟体内细胞间的相互作用，如细胞迁移、侵袭、分泌等。其基本原理是将两种或多种细胞分别接种在多孔膜的两侧，通过半透膜允许营养物质、代谢产物和某些细胞因子等小分子物质通过，但不允许细胞直接接触。
Transwell共培养的标准步骤通常包括：
1. 选择适当孔径（常见有0.4μm、3.0μm等）的Transwell小室，根据实验目的确定。
2. 底室加入目标细胞或者 feeder细胞（提供生长因子或其他条件支持的细胞），按照适当的密度铺板。
3. 将待研究的细胞悬液加入到Transwell上室中，调整适宜的细胞密度。
4. 加入适量完全培养基，保证上下两层细胞均能正常生长。
5. 根据实验设计，进行一定时间的共培养后，可以通过显微镜观察、生化检测、分子生物学方法等对细胞的行为变化进行分析。
6. 实验过程中需严格控制温度、湿度以及CO2浓度等环境因素，保持与常规细胞培养一致。
以上仅为大致流程，具体操作应参照相关文献及实验指导，根据不同细胞类型和实验目的进行适当调整。

Transwell共培养流程

Transwell共培养是一种常用的体外细胞实验技术，用于模拟体内细胞间的相互作用，尤其是在研究细胞迁移、侵袭、分泌物质的相互影响等方面。以下是基本的Transwell共培养流程：
1. 准备材料：主要包括Transwell小室（通常有8μm或0.4μm孔径可选，根据实验需求选择）、细胞培养液、待共培养的两种细胞（上层和下层细胞）以及相关细胞培养耗材。
2. 细胞处理：
将下层细胞种在Transwell小室下方的平板中，按照常规细胞培养方法预培养至贴壁生长稳定。
上层细胞进行适当的处理（如转染、药物处理等），并调整细胞浓度。
3. 组装Transwell小室：
取适量上层细胞悬液加入Transwell小室的滤膜上部，并轻轻晃动使细胞均匀分布。
注意：确保滤膜湿润且无气泡。
4. 共培养：
将装有上层细胞的小室倒扣在已铺有下层细胞的平板上，确保上下层细胞不直接接触（对于需要间接相互作用的研究）。
加入充足的细胞培养液覆盖小室底部和上室。
5. 孵育：
将组装好的共培养系统放入细胞培养箱中，在适宜的温度和湿度条件下孵育一段时间（如几小时至几天，依据实验设计）。
6. 观察与检测：
共培养结束后，取出Transwell小室，对上层和下层细胞分别进行所需的生物学效应检测，例如细胞迁移、侵袭能力的测定，或者通过Western Blot、ELISA等方式检测细胞因子的表达和分泌变化等。
以上步骤为基本流程，具体操作时需根据实验目的和细胞特性进行适当调整。