化妆品体外哺乳动物细胞微核试验

化妆品体外哺乳动物细胞微核试验是一种毒理学和遗传毒性评价方法，主要用于检测化妆品原料及其成品是否具有潜在的遗传毒性。该试验通过在体外培养哺乳动物细胞（如中国仓鼠肺细胞、人淋巴细胞等），在实验条件下暴露于待测化妆品成分后，观察细胞中微核（micronucleus，MN）的发生率。
微核是由于染色体断裂或整条染色体丢失而在细胞分裂时未能进入子细胞核而形成的微小细胞核，是染色体损伤的一个重要生物标志物。若化妆品样品处理组的微核率显著高于对照组，则提示该化妆品可能具有遗传毒性，对生物遗传物质有潜在损害风险。这项试验对于保障化妆品的安全性，防止其对消费者健康产生潜在危害具有重要意义。
检测标准
化妆品体外哺乳动物细胞微核试验标准主要参考《化妆品安全技术规范》（2015年版）和国际上通用的 OECD Test Guideline 487《体外哺乳动物细胞微核试验》。
该试验主要是通过检测化妆品成分在体外对哺乳动物细胞（如CHO细胞、HL60细胞等）引起的染色体损伤程度，以评估其遗传毒性。具体步骤包括：
1. 将化妆品原料或成品提取物与培养的哺乳动物细胞共同孵育； 2. 细胞经固定、消化、染色后，在显微镜下观察并计数微核率； 3. 根据微核率的变化来判断化妆品是否具有遗传毒性。
具体评价结果通常分为阴性（微核率在对照组正常变异范围内）、可疑（微核率稍高于对照组但无统计学差异）和阳性（微核率显著增高且有统计学意义）。
请注意，进行此类试验需遵守相关国家法律法规，并由具备相应资质的实验室按照标准操作程序执行。
检测流程
化妆品体外哺乳动物细胞微核试验是一种用于评估化妆品原料或成品遗传毒性的重要方法，主要通过观察细胞微核的形成数量来判断样品是否具有潜在的染色体损伤作用。以下是该试验的一般流程：
1. **实验准备阶段** - 选取合适的哺乳动物细胞系（如中国仓鼠肺细胞CHO-K1、人胚肾细胞HEK293等）进行培养。 - 准备待测化妆品样品，根据细胞敏感性和化妆品特性进行适当的稀释。
2. **暴露处理阶段** - 将细胞接种在含有不同浓度化妆品样品的培养基中，同时设立对照组（仅含培养基的细胞）和阳性对照组（已知能诱导微核产生的物质处理的细胞）。 - 在适宜的条件下（如37℃、5% CO2）孵育一段时间（通常为24-48小时），让化妆品成分与细胞充分接触。
3. **细胞固定与染色阶段** - 将处理过的细胞用适当的方法（如冰醋酸/甲醇溶液）固定，使细胞膜破裂，染色质凝聚。 - 用荧光染料或者吉姆萨染液对细胞内的染色体和微核进行染色。
4. **镜检与计数阶段** - 通过显微镜对固定并染色的细胞进行镜检，寻找和计数细胞内的微核（无着丝粒的小块染色体DNA）。 - 根据一定的评判标准（例如每个细胞内微核的数量）统计各组微核率。
5. **数据分析与结论** - 对照组与实验组的数据进行统计学分析，比较微核率是否存在显著性差异。 - 如果样品处理组的微核率明显高于对照组，则可能表明该化妆品样品具有潜在的遗传毒性风险。
以上是大致的试验流程，具体操作需严格遵循相关国家标准或国际指导原则，并由专业的检测机构执行。