细菌回复突变试验

细菌回复突变试验（Bacterial Reverse Mutation Assay，也称为Ames试验）是一种用于检测化学物质是否具有遗传毒性，特别是是否为致突变物的生物检测方法。该试验由微生物学家Bruce N. Ames在1970年代初发明，以他的名字命名。
在Ames试验中，通常使用一组已知突变的 Salmonella typhimurium（鼠伤寒沙门氏菌）或Escherichia coli（大肠杆菌）菌株，这些菌株由于特定基因突变导致不能在基本培养基上生长，但若能回复突变则可在添加了某些氨基酸或其他营养缺陷补充剂的培养基上生长。
测试时，将待测化学物质加入到这些菌株的培养基中，如果这些化学物质能够引起菌体DNA的突变并回复到野生型，即恢复了在基本培养基上生长的能力，则认为该化学物质具有致突变性。这项试验是全球广泛采用的初步遗传毒理学筛选试验之一，在化学品安全性评估和环境监测中有重要作用。
检测标准
细菌回复突变试验，也称为 Ames 试验，是一种检测化学物质是否具有遗传毒性（特别是致突变性）的体外生物检测方法。该试验的标准主要参考国际上公认的标准，例如：
1. OECD (Organisation for Economic Co-operation and Development) Guidelines for the Testing of Chemicals: Test No. 471 - Bacterial Reverse Mutation Test。
2. ISO (International Organization for Standardization) 16333:2013 - In vitro mammalian cell micronucleus test.
在中国，相关的标准为：
3. GB/T 15193.3-2014《化学品遗传毒性鉴定 第3部分：鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验》。
Ames 试验的基本流程包括： (1) 使用几种不同的、已知突变类型的鼠伤寒沙门氏菌株。 (2) 将待测化学物质与细菌在培养基中孵育。 (3) 观察和计数在含特定营养缺陷型平板上的回复突变菌落，以评估化学物质是否诱发了细菌基因突变。
通过此试验，可以初步判断化学物质是否存在潜在的遗传毒性风险，为化学品的安全性评价提供依据。
检测流程
细菌回复突变试验（Ames test）是一种用于检测化学品、药物、食品等物质是否存在潜在遗传毒性，特别是是否具有致突变性的标准生物检测方法。其基本流程如下：
1. **菌种准备**：主要使用鼠伤寒沙门氏菌的特定菌株，这些菌株因缺乏合成某些氨基酸的能力，仅在添加相应氨基酸时才能正常生长。
2. **待测物处理**：将待测物质用适宜溶剂溶解，并进行一系列浓度梯度稀释，以便观察不同浓度下的反应。
3. **实验组设立**：包括阳性对照组（已知的致突变剂）、阴性对照组（溶剂对照）以及不同浓度的待测物组。
4. **接种培养**：将上述各组菌液与琼脂培养基混合，并加入适量的回补突变所需氨基酸，然后倒入培养皿中凝固，使待测物均匀分布于培养基中。
5. **培养和计数**：将培养皿在适宜温度下倒置培养一段时间后，统计各个平板上出现的菌落（由于突变使得菌株恢复了合成氨基酸的能力，能够在无氨基酸的培养基上形成菌落）。
6. **结果分析**：对比各组的菌落数量，如果待测物组的菌落数显著高于阴性对照组，并且接近或等于阳性对照组，说明该待测物可能具有致突变性。
整个流程需要严格的质量控制和操作规范，确保结果的准确性和可靠性。同时，根据相关法规要求，这类试验通常由有资质的检测机构完成。