流式细胞测定
来源:忠科集团
忠科集团提供的流式细胞测定,流式细胞测定(FlowCytometry)是一种在生物学、医学和免疫学等领域广泛应用的实验技术,主要用于快速、定量地分析单个细胞或者微粒的物理特性和化学组成,报告具有CMA,CNAS认证资质。

流式细胞测定(Flow Cytometry)是一种在生物学、医学和免疫学等领域广泛应用的实验技术,主要用于快速、定量地分析单个细胞或者微粒的物理特性和化学组成。在该技术中,待测样本(如细胞悬液)以高速流过检测区域时,每个细胞会依次通过激光束的照射,根据细胞内或表面标记物与特定荧光染料或抗体结合后的荧光信号,以及前向散射光和侧向散射光等参数,实现对单个细胞的多参数同时分析。
流式细胞仪可以用来进行细胞计数、细胞周期分析、细胞凋亡检测、免疫表型分析、DNA含量测定、细胞功能研究等多种应用。这项技术具有高通量、快速准确的特点,在疾病诊断、药物筛选、基础研究等方面发挥着重要作用。
检测标准
流式细胞测定(Flow Cytometry,FCM)是一种高通量、多参数的生物物理技术,用于快速分析和分选悬浮液中的单个细胞或颗粒。其标准主要包括以下几个方面:
1. **样本制备**:样本需要进行适当的标记处理,通常使用荧光标记抗体或其他荧光染料对细胞内的特定抗原或核酸进行标记。同时,样本应充分分散,避免细胞聚集。
2. **仪器校准与设定**:包括激光功率校准、光电倍增管电压设定(FSC, SSC 和各种荧光通道)、补偿设置等,以确保数据准确无误。
3. **质量控制**:定期进行仪器性能验证,如运行荧光微球或已知细胞系的标准品,以监控仪器稳定性及准确性。
4. **数据分析标准**:采用国际公认的数据分析软件进行数据处理,确定门控策略,对细胞群体进行分类,并确保统计结果的有效性和可靠性。
5. **实验操作规程**:遵循标准化的操作流程,减少操作误差,提高实验重复性。
6. **结果解读**:根据所测指标和目的,结合临床或科研背景,准确解读流式细胞术数据。
以上是流式细胞测定的基本标准,实际操作中还需依据具体的实验设计和研究需求进行调整和完善。
检测流程
流式细胞术是一种高通量、高速度的生物物理技术,它可以实时分析单个细胞或微粒的多种物理和化学性质。以下是进行流式细胞测定的一般流程:
1. 样品准备:
根据实验目的,对细胞样本进行特定处理,如染色标记(可能包括细胞表面抗原标记、细胞内分子标记等)。
将处理后的细胞样本悬浮在适当的缓冲液中,并尽量保持细胞活性与分散性。
2. 仪器设定与校准:
开启并初始化流式细胞仪,选择合适的激光器波长和检测器通道,对应不同的荧光染料或细胞物理特性。
进行仪器校准,通常包括FSC/SSC电压调整(反映细胞大小和内部复杂度),以及各个荧光通道的电压优化。
3. 样本检测:
将制备好的样本加入流式细胞仪进样系统,开始进行细胞检测。
流式细胞仪将细胞逐一通过激光束,收集散射光信号和荧光信号。
4. 数据采集与分析:
数据被实时记录并传输至计算机软件进行分析,形成散点图、直方图或二维/三维图像等。
分析数据时,可以通过设置门控策略,区分不同类型的细胞群体;也可以统计各种参数的表达强度和分布情况。
5. 结果解读与报告:
根据实验设计和数据分析结果,解读细胞群体特征,如细胞周期、凋亡率、分化状态、表型比例等信息。
撰写详细的实验报告,包括实验方法、结果展示、结论讨论等内容。
6. 质量控制与验证:
实验室通常需要对实验结果进行严格的质量控制,确保数据准确可靠,必要时进行重复实验或与其他检测方法进行比对验证。
以上流程是通用的基本步骤,具体操作细节会根据实际实验设计、设备型号及研究需求有所不同。