酶联免疫吸附试验

忠科集团提供的酶联免疫吸附试验,酶联免疫吸附试验(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay,简称ELISA)是一种广泛应用在生物医学实验室的免疫检测技术,报告具有CMA,CNAS认证资质。
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酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种广泛应用在生物医学实验室的免疫检测技术。它主要基于抗原抗体特异性结合原理,并通过酶催化底物显色反应来定量或定性检测样品中的抗原或抗体。
具体步骤包括:首先,将待测抗原(或抗体)固定在固相载体上,形成固相抗原(或抗体);然后加入相应的抗体(或抗原)与之结合;再通过加入酶标记的第二抗体(或抗原),使酶与结合物相结合;最后,通过加入酶作用的底物,经酶催化反应后产生颜色变化,通过比色法测定颜色深浅,从而间接反映出样品中待测抗原或抗体的含量。
该方法具有灵敏度高、特异性强、操作简便快捷等特点,被广泛应用于临床诊断、疾病监测、食品安全检测、环境监测等诸多领域。

检测标准


酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,简称ELISA)是一种广泛应用的免疫学检测方法,其标准主要包括以下几个方面:
1. **实验原理**:基于抗原-抗体特异性结合原理,通过酶标记的抗体与固相载体上的抗原或抗体发生反应,再与酶底物反应生成有色产物,通过比色法或荧光检测器等测定吸光度变化,从而定量或定性分析样品中的待测物质。
2. **实验步骤**: - 包被:将已知的抗原或抗体固定在固相载体上。 - 封闭:用无关蛋白封闭未结合位点,减少非特异性结合。 - 加样:加入待测样本,使其与包被的抗原或抗体结合。 - 洗涤:去除未结合的样本成分。 - 加酶标抗体:加入针对待测物的酶标记抗体,形成“抗原-抗体-酶标抗体”复合物。 - 再次洗涤:去除未结合的酶标抗体。 - 显色:加入酶底物,经酶催化后显色。 - 终止反应:加入终止液停止酶反应。 - 测定:在特定波长下测定吸光度,根据标准曲线计算待测物浓度。
3. **质量控制**:包括试剂的质量、操作过程的规范性、仪器设备的准确性以及结果判断的标准等。应设立阳性对照、阴性对照及临界值,以确保结果的准确性和可靠性。
4. **结果解释**:按照预先设定的临界值和标准曲线,将实验数据转化为实际的浓度或含量,并对结果进行科学合理的解读。
以上就是酶联免疫吸附试验的基本标准,具体操作时还需参照相关试剂盒说明书并遵循实验室内部质控程序。

检测流程


酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种广泛应用于临床诊断、食品检验、环境监测等领域,用于检测和定量样本中特定抗体或抗原的实验技术。以下是实验室进行ELISA检测的一般流程:
1. **样本准备**:首先,接收并登记待测样本(如血清、血浆、组织提取液等),然后按照所需实验条件对样本进行适当处理,可能包括稀释、加热灭活内源性酶活性等步骤。
2. **包被反应板**:选择合适的微孔板,将已知的抗原或抗体固定在微孔板上,形成固相抗体或抗原,然后进行封闭,以减少非特异性结合。
3. **加样**:将待测样本或标准品加入到微孔板中,使其与固相上的抗原或抗体进行反应,孵育一段时间。
4. **洗板**:孵育后,用洗涤液反复冲洗微孔板,以去除未结合的成分。
5. **加入酶标抗体**:向每个孔中加入针对目标分子标记有酶的抗体(如辣根过氧化物酶标记的二抗),再次孵育。
6. **二次洗板**:孵育后再次进行洗板操作,清除未结合的酶标抗体。
7. **显色**:向孔内加入含有酶底物的溶液,当酶与底物反应时会产生可检测的颜色变化或荧光信号。
8. **终止反应**:在达到足够强度的颜色反应后,加入终止液停止酶反应。
9. **读数**:使用酶标仪在特定波长下测定各孔吸光度值。
10. **结果分析**:根据标准曲线计算样本中目标抗原或抗体的浓度,并出具检测报告。
以上是一般的ELISA实验流程,具体的步骤可能会因不同的检测目标和试剂盒而有所差异。
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