体外哺乳动物细胞微核试验
来源:忠科集团
忠科集团提供的体外哺乳动物细胞微核试验,体外哺乳动物细胞微核试验是一种生物检测方法,主要用于评估受试物质(如药物、化学物质、放射线等)的遗传毒性,报告具有CMA,CNAS认证资质。

体外哺乳动物细胞微核试验是一种生物检测方法,主要用于评估受试物质(如药物、化学物质、放射线等)的遗传毒性。该试验基于观察和计数细胞中形成的微核数量,微核是由染色体片段或整条染色体在有丝分裂过程中未能正确进入子细胞核而形成的。
具体实验操作通常包括将待测物质加入到培养的哺乳动物细胞中,经过一定时间处理后,利用特殊染色技术使微核着色,然后在显微镜下观察并统计细胞中的微核数目。微核数量的增加往往提示受试物质具有潜在的遗传毒性,可能造成染色体损伤或断裂,进而影响生物体的遗传稳定性。
这项试验是遗传毒理学和环境毒理学领域中广泛应用的安全性评价手段之一,对于药品开发、化学品安全性评估以及环境保护等领域具有重要意义。
体外哺乳动物细胞微核试验标准
体外哺乳动物细胞微核试验(In Vitro Mammalian Cell Micronucleus Test,简称MN test)是一种广泛用于检测化学物质、药物、放射线等诱变效应的遗传毒性试验方法。其主要通过观察处理后细胞中微核(micronucleus,MN)的形成情况来评估受试物是否具有染色体损伤或断裂重排的能力。
标准操作流程一般参考国际和国内的相关指导原则:
1. 国际上主要参照《OECD 测试指南 487:体外哺乳动物细胞微核试验》(OECD Test Guideline 487: In vitro Mammalian Cell Micronucleus Test)。
2. 在中国,可参考《化学品遗传毒性鉴定技术规范 第3部分:体外哺乳动物细胞微核试验》(GB/T 15193.3-2014)。
这些标准主要包括以下几个关键步骤:
- 细胞培养及处理:选择合适的哺乳动物细胞系进行培养,并对细胞进行不同浓度梯度的受试物处理。
- 微核的制片与染色:在适当的时间点收获细胞,固定、染色后制作涂片,以便于显微镜下观察微核。
- 微核计数与统计分析:在显微镜下对细胞中的微核进行计数,并根据阴性对照和阳性对照的结果进行统计分析,计算微核率。
- 结果判定:根据微核率的变化,判断受试物是否具有遗传毒性。
体外哺乳动物细胞微核试验流程
体外哺乳动物细胞微核试验是一种评估化学物质、药物、放射线等诱导染色体损伤的遗传毒性检测方法。其基本流程如下:
1. 细胞培养:选择对实验物质敏感且易于培养的哺乳动物细胞(如CHO细胞、V79细胞等),在适宜的培养基和条件下进行预培养。
2. 实验处理:将待测物质加入到细胞培养体系中,设置不同浓度梯度以及对照组(含溶剂对照)和阳性对照组(已知能引起微核产生的物质)。按照预定时间孵育后,终止实验处理。
3. 细胞固定与染色:将处理后的细胞用适当的固定液固定,然后使用吉姆萨染液或 Hoechst 33258 等荧光染料进行染色,使得细胞内的染色体和微核得以清晰显现。
4. 镜检计数:在显微镜下观察并计数每个细胞中的微核数量。微核是由断裂的染色体片段或者整条染色体未能进入子细胞核而在细胞浆中形成的无着丝粒的小核。
5. 数据分析:统计各处理组和对照组的微核率(即含有微核的细胞占总细胞数的比例),并通过统计学方法分析数据,判断待测物质是否具有染色体损伤效应。
6. 结果解读:如果待测物质处理组的微核率显著高于对照组,则可认为该物质具有潜在的遗传毒性。
以上就是体外哺乳动物细胞微核试验的基本流程,具体操作可能会根据实验室的具体规程和相关法规要求有所差异。