蛋白分子量分子检测
来源:忠科集团
忠科集团提供的蛋白分子量分子检测,蛋白分子量检测是指通过生物化学或物理方法对蛋白质分子的质量进行精确测定的过程。这种检测通常在蛋白质研究、药物研发、疾病诊断等领域中广泛应用,报告具有CMA,CNAS认证资质。

蛋白分子量检测是指通过生物化学或物理方法对蛋白质分子的质量进行精确测定的过程。这种检测通常在蛋白质研究、药物研发、疾病诊断等领域中广泛应用。常见的蛋白分子量检测技术包括质谱分析(如MALDI-TOF MS)、SDS-PAGE电泳、凝胶渗透色谱法(GPC)等,通过比较未知蛋白质与已知标准蛋白质在这些技术平台上的行为,可以准确估算出其分子量大小。
蛋白分子量分子检测标准
蛋白分子量的检测标准通常采用以下几种方法:
1. 蛋白质电泳:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术,蛋白质在强还原剂和SDS的作用下解折叠并带负电荷,依据分子大小进行分离。通过与已知分子量的标准蛋白比较,可以测定未知蛋白质的相对分子量。
2. 高效液相色谱法(HPLC):如尺寸排阻色谱(SEC),可以根据分子大小将蛋白质分离开来,并通过与已知分子量的标准品对比,确定待测蛋白质的分子量。
3. 质谱分析(MS):包括基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)和电喷雾离子化质谱(ESI-MS)等,可以直接测定蛋白质的精确分子量,不受其电荷状态影响,特别适用于绝对分子量的测定。
4. 尿素二硫苏糖醇毛细管电泳(Urea-DSCE)等其他电泳技术,也可用于蛋白质分子量的测定。
以上各种方法的选择需根据实验条件、设备条件及样品特性等因素综合考虑。
蛋白分子量分子检测流程
蛋白分子量检测流程通常包括以下几个步骤:
1. 样品准备:
客户提供待测的蛋白质样品,通常是纯化后的蛋白质溶液。
样品可能需要通过透析、超滤或其他方式去除盐离子、缓冲液成分等,确保不影响检测结果。
2. 电泳分离:
采用SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)对蛋白质进行分离。根据蛋白质分子量大小的不同,它们在电场作用下迁移的速度也不同,从而达到分离目的。
3. 蛋白质转膜:
将从SDS-PAGE中分离出的蛋白质转移到PVDF或NC膜上。
4. 蛋白质固定与标记:
转移后的蛋白质在膜上进行固定,并使用特定的探针(如辣根过氧化物酶标记的抗体或荧光标记的蛋白质染料)进行标记。
5. 分子量测定:
通过Western Blotting或者Stain-Free技术,结合预置的分子量标准Marker,通过比较未知蛋白质条带与已知分子量的标准蛋白质条带,确定未知蛋白质的相对分子量。
6. 数据分析:
使用成像系统获取并分析图像数据,精确测量目标蛋白条带的迁移距离和强度,对比分子量标准计算得到样品蛋白的分子量。
7. 报告出具:
检测完成后,检测机构会出具详细的实验报告,包括原始图像、数据分析结果以及样品蛋白的分子量等信息。
以上是一般性的蛋白分子量检测流程,具体操作可能会因实验室条件、设备和技术选择等因素有所差异。