蛋白等电点

忠科集团提供的蛋白等电点,蛋白等电点是指蛋白质分子在特定pH溶液中,其正电荷总数与负电荷总数相等时的pH值,报告具有CMA,CNAS认证资质。
蛋白等电点
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蛋白等电点是指蛋白质分子在特定pH溶液中,其正电荷总数与负电荷总数相等时的pH值。此时,蛋白质所带净电荷为零,因此,在电场中不再泳动,具有最小溶解度,容易发生沉淀。每种蛋白质都有其特定的等电点,这是由于其氨基酸组成和排列顺序的不同所决定的。通过测定蛋白质的等电点,可以了解蛋白质的性质,有助于蛋白质的分离纯化和鉴定。

检测标准


蛋白质的等电点(pI,Isoelectric Point)是指在某一特定pH环境下,蛋白质分子所带净电荷为零的状态,此时蛋白质分子的正电荷数和负电荷数相等,溶解度最小,容易发生沉淀。每种蛋白质由于其氨基酸组成和序列的不同,具有特定的等电点。
一般来说,大多数蛋白质的等电点在4.0-10.0之间变化。要精确测定某种特定蛋白质的等电点,可以通过实验方法如等电聚焦电泳(Isoelectric Focusing, IEF)进行测定。
对于实际科研或工业生产中,了解蛋白质的等电点有助于优化蛋白质的分离、纯化以及后续的功能研究等工作。

检测流程


蛋白等电点的测定流程主要包括以下几个步骤:
1. 蛋白质样品制备:首先,需要纯化待测蛋白质,确保样品中主要成分是目标蛋白质,无明显杂质干扰。
2. 等电点缓冲液配制:根据待测蛋白质的理论等电点范围,选择并配制一系列具有不同pH值的缓冲液。这些缓冲液将在后续实验中用于调节溶液环境的pH值。
3. 电泳实验:将制备好的蛋白质样品分别加入到上述各pH值的缓冲液中进行等电聚焦电泳(如Isoelectric Focusing, IEF)。在电场作用下,蛋白质会迁移至其等电点所在的pH值位置,停止移动。
4. 结果观察与分析:电泳结束后,通过染色法(如考马斯亮蓝染色)对凝胶进行染色,显影后可以观察到一条清晰的蛋白质带,该条带所在的位置对应的pH值即为该蛋白质的等电点。
5. 数据记录与确认:记录下目标蛋白质聚焦带的pH值,并可能需要多次重复实验以验证结果的准确性。
需要注意的是,实际操作中可能还需考虑温度、离子强度等因素的影响,以及所用设备的具体操作规程。同时,部分实验室或企业可能会委托有资质的检测机构进行此类测试服务。
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