过氧化氢酶测定
来源:忠科集团
忠科集团提供的过氧化氢酶测定,过氧化氢酶测定是一种生物化学检测方法,主要用于测定血清、组织或其他生物样本中过氧化氢酶(Catalase)的活性,报告具有CMA,CNAS认证资质。

过氧化氢酶测定是一种生物化学检测方法,主要用于测定血清、组织或其他生物样本中过氧化氢酶(Catalase)的活性。过氧化氢酶是一种存在于细胞中的重要酶类,它在生物体内的主要功能是催化过氧化氢分解为水和氧气,从而保护细胞免受过氧化氢毒性损伤。
通过过氧化氢酶活性的测定,可以帮助了解机体抗氧化系统状态,对某些疾病的诊断和病情监测具有重要意义,如肝病、心肌梗死、炎症反应等疾病时,过氧化氢酶的活性可能会发生改变。此外,该测定也在环境科学、食品工业、药物研究等领域中有广泛应用。
检测标准
过氧化氢酶测定的标准通常指的是其在特定条件下催化分解过氧化氢的活性单位。这个标准一般用国际单位IU来表示,定义为:在37℃条件下,每分钟能催化分解1微摩尔过氧化氢所需的酶量定义为一个酶活单位(U)。
具体实验操作中,过氧化氢酶活性的测定方法有很多种,比如通过比色法测定产物氧气的生成量,或者通过测定反应体系中过氧化氢浓度的变化等。不同实验室可能会根据实际需求和实验条件制定相应的测定标准和操作流程。
此外,在临床检验或工业应用中,过氧化氢酶的正常参考值范围也会因检测方法、试剂盒的不同以及样本来源(如血清、血浆、组织匀浆等)而有所差异,需参照具体实验或检验项目的参考区间进行解读。
检测流程
过氧化氢酶测定流程通常包括以下几个步骤:
1. 样品准备:
收集待测样本,这可以是血清、血浆、组织匀浆液或细胞培养上清液等。
按照实验室规定的方法处理和稀释样本,确保样本中的酶活性不被破坏。
2. 试剂准备:
准备过氧化氢酶检测所需的底物(如过氧化氢),显色剂(如邻苯二胺(OPD)或其他指示剂)以及缓冲液等。
配制工作溶液,并确保所有试剂都在有效期内且保存条件适当。
3. 测定操作:
将处理好的样本加入含有底物的反应体系中,在一定温度和时间内进行孵育。
过氧化氢酶会催化过氧化氢分解,产生水和氧气,同时通过显色反应监测产物生成量的变化。
4. 显色与测定:
在设定的反应时间结束后,添加终止液终止反应,然后通过分光光度计在特定波长下测定吸光值。
或者在某些情况下,可以通过比色法直接观察颜色变化并读取OD值。
5. 结果计算:
依据标准曲线(由已知浓度的标准品建立)或者参考厂商提供的公式,将吸光值转换为过氧化氢酶的活性单位(如U/L或Katal/L)。
6. 质量控制:
同时测定质控品以验证实验过程的准确性和可靠性。
请注意,不同实验室或检测机构可能会根据所使用的试剂盒及设备有所不同,具体的测定流程应参照相关产品的说明书或遵循实验室内部标准操作程序。