Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型
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忠科集团提供的Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型,Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型,是一种经过遗传工程改造的小鼠模型,报告具有CMA,CNAS认证资质。

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Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型
Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型,是一种经过遗传工程改造的小鼠模型。在该模型中,研究人员特异性地去除了(敲除)小鼠体内编码Serinc2蛋白的基因,以研究Serinc2基因在心肌功能、发育以及疾病发生过程中的作用。
心肌肥厚是心脏对各种病理刺激(如长期高血压、瓣膜病等)的一种代偿性反应,但过度的心肌肥厚可进一步发展为心力衰竭。通过构建Serinc2基因敲除的心肌肥厚小鼠模型,科学家可以探究Serinc2基因在调控心肌肥厚进程中的具体机制,从而为相关心血管疾病的预防和治疗提供理论依据和潜在的药物靶点。
检测标准
构建Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型的标准步骤主要包括以下几点:
1. 设计和构建:首先,基于已知的Serinc2基因序列设计针对该基因的特异性sgRNA或者同源重组打靶载体。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术或ES细胞同源重组方法,在小鼠胚胎干细胞中实现Serinc2基因的有效敲除。
2. 验证与筛选:通过PCR、测序等分子生物学手段验证胚胎干细胞中的Serinc2基因是否成功敲除,并筛选出阳性克隆。
3. 小鼠生成:将成功敲除Serinc2基因的胚胎干细胞移植到代孕母鼠体内,使其发育成嵌合体小鼠,进一步通过近交繁殖获得纯合的Serinc2基因敲除小鼠。
4. 表型分析:对得到的Serinc2基因敲除小鼠进行形态学、生理学及病理学等多方面的表型分析,包括但不限于心肌组织结构、心脏功能(如超声心动图检查)、心肌肥厚相关指标的检测等,以确认其是否符合心肌肥厚模型的特点。
5. 功能研究:进一步研究Serinc2基因缺失对心肌肥厚发生发展的影响及其内在机制,为相关疾病的预防和治疗提供理论依据。
以上流程需遵循实验动物伦理并符合相关的国家标准和国际指南。
检测流程
构建Serinc2基因敲除心肌肥厚小鼠模型的流程大致如下:
1. 设计sgRNA:首先,根据Serinc2基因的序列信息,利用CRISPR/Cas9系统设计针对该基因的有效sgRNA(单导向RNA),确保其能精确靶向到Serinc2基因的特定区域。
2. 构建质粒:将设计好的sgRNA序列插入到含有Cas9表达元件的质粒中,构建出sgRNA-Cas9复合表达载体。
3. 胚胎干细胞转染:将构建好的重组质粒通过电穿孔、脂质体转染等方式导入到小鼠胚胎干细胞(ESCs)中。
4. 阳性克隆筛选:通过PCR、测序等方法筛选成功敲除Serinc2基因的胚胎干细胞克隆。
5. 嵌合体小鼠制备:将筛选到的阳性胚胎干细胞注射到囊胚期小鼠胚胎内,然后将这些囊胚移植到代孕母鼠子宫内,发育成嵌合体小鼠。
6. 遗传纯合子小鼠获得:让嵌合体小鼠与野生型小鼠杂交,通过F1代进一步筛选并确认Serinc2基因敲除的杂合子小鼠。再通过杂合子间的互配,得到Serinc2基因全敲除的纯合子小鼠。
7. 表型分析:对获得的Serinc2基因敲除小鼠进行生理生化检测以及病理组织学检查,验证是否存在心肌肥厚表型。
以上步骤涉及到生物安全和伦理审查,请在实验操作前严格遵守相关法规和指南。同时,具体实验细节可能因研究者的技术路线和实验室条件有所不同。