EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型

忠科集团提供的EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型,EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型是一种科学研究模型,主要用于研究肠道病毒71型(Enterovirus71,EV71)感染的致病机制和疫苗、药物的研发,报告具有CMA,CNAS认证资质。
EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型
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EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型是一种科学研究模型,主要用于研究肠道病毒71型(Enterovirus 71, EV71)感染的致病机制和疫苗、药物的研发。在该模型中,科学家将人的P-选择素糖蛋白配体1(P-selectin glycoprotein ligand-1, PSGL-1)基因转入到小鼠体内,使小鼠能够表达人源的PSGL-1蛋白。
PSGL-1是EV71识别并结合宿主细胞的一种重要受体,因此,这种转基因小鼠能够模拟人体对EV71感染的反应,为深入研究EV71感染后的病理变化、免疫应答以及评估抗EV71药物和疫苗的效果提供了有效的实验工具。

检测标准


EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型是研究手足口病病毒(Enterovirus 71,EV71)致病机制和疫苗评价的重要工具。该模型的构建主要是通过将人的P-选择素糖蛋白配体-1(PSGL-1)基因转入小鼠体内,因为PSGL-1是EV71识别并感染宿主细胞的关键受体。
标准的EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型评估主要包括以下几个方面:
1. **基因转染效率与稳定性**:首先需要验证小鼠是否成功稳定表达人PSGL-1基因,这通常通过PCR、免疫组化或Western Blot等分子生物学技术来检测。
2. **小鼠对EV71的易感性**:将不同剂量的EV71病毒接种到转基因小鼠体内,观察其临床症状、生存率、体重变化以及病理变化,确认转基因小鼠对EV71具有较高的敏感性和复制能力。
3. **组织分布与病理学特征**:通过病毒载量测定及组织病理学检查,分析EV71在转基因小鼠体内的分布情况及其引起的病理改变,这些结果应与EV71感染人体后的特征相一致。
4. **免疫反应**:评估小鼠模型在病毒感染后产生的免疫应答,包括中和抗体水平、细胞免疫反应等,以进一步验证模型的有效性。
只有满足上述标准的EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型才能被认为是科学、可靠的研究工具。

检测流程


构建EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型的流程大致如下:
1. 构建基因表达载体:首先,获取人的PSGL-1(P-selectin glycoprotein ligand-1)基因序列,并通过生物工程技术将其插入到适当的表达载体中,如逆转录病毒、腺病毒或哺乳动物表达载体等,使其能够在小鼠体内稳定表达。
2. 转基因小鼠制备:将构建好的基因表达载体通过显微注射等方式注入小鼠受精卵的原核或者利用胚胎干细胞技术进行基因打靶。然后将注射过的受精卵移植到代孕母鼠子宫内,待其发育成熟后获得携带人PSGL-1基因的转基因小鼠。
3. 鉴定与繁殖:对出生的小鼠进行PCR、Southern blotting、Northern blotting或免疫组化等分子生物学方法鉴定,确认其成功表达了人PSGL-1蛋白。验证成功的转基因小鼠进行扩群繁殖,建立稳定的转基因小鼠品系。
4. 病毒感染实验:使用EV71(Enterovirus 71)病毒株对已证实表达人PSGL-1的转基因小鼠进行感染实验,观察并记录小鼠的症状、体重变化、病理组织学改变以及体内的病毒载量等指标,从而验证该模型的有效性和适用性。
5. 功能研究和机制探讨:通过此模型研究EV71如何通过人PSGL-1介导侵入宿主细胞,以及在疾病发生发展过程中的作用机制。
以上就是构建EV71感染人PSGL-1转基因小鼠模型的一般流程,具体操作需根据实验室条件和研究需求进行调整优化。
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